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更新時間：2022-11-15
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| 步驟 | GB 5009.111-2016 傳統(tǒng)SPE柱法凈化（嘔吐毒素） | GB 5009.22-2016 黃曲霉毒素免疫親和柱 | GB 5009.96-2016 赭曲霉毒素A免疫親和柱法 | FaTEx 多真菌毒素專用SPE柱法 |
| 1 | 稱取2g樣品，于50mL離心管中 | 稱取5g樣品，于50mL離心管中 | 稱取25g樣品，加入5g氯化鈉 | 1、稱取2g樣品，于50mL離心管中 |
| 2 | 加內(nèi)標溶液，靜置30min | 加內(nèi)標溶液，靜置30min | 用提取液Ⅰ定容到100mL，混勻 | 2、加入 12mL 70%酸化乙腈溶液 |
| 3 | 加入20mL乙腈-水溶液，渦旋混勻 | 加入20mL乙腈-水溶液，渦旋混勻 | 高速均質(zhì)2min | 3、高速振蕩30min |
| 4 | 超聲或渦旋振蕩20min | 超聲或渦旋振蕩20min | 用定性濾紙過濾 | 4、離心5min，取5mL上清液到FaTEx SPE柱內(nèi) |
| 5 | 離心5min，取5mL上清液 | 離心10min，取4mL上清液 | 移取10mL濾液于50mL容量瓶 | 5、以每秒1滴過柱，收集濾液 |
| 6 | 加入10mL乙腈飽和正己烷溶液 | 加入46mL 1% Trition X-100的PBS，混勻得到樣液 | 加水定容至刻度，混勻 | 6、取1.2mL濾液濃縮至近干 |
| 7 | 渦旋2min | 將低溫保存的免疫親和柱恢復(fù)至室溫，將原有液體流盡 | 經(jīng)玻璃纖維濾紙過濾澄清，收集濾液A于容器 | 7、以1mL50%乙腈-水溶液回溶 |
| 8 | 離心2min，棄去正己烷層 | 將上述樣液以1-3mL/min的速度通過免疫親和柱 | 移取10mL濾液A，以每秒1滴通過免疫親和柱 | 8、過濾膜，上機到LC-MS/MS分析 |
| 9 | 氮吹近干，加入4mL水復(fù)溶為溶液A | 用20mL水淋洗免疫親和柱 | 用10mLPBS緩沖液通過親合柱 | |
| 10 | 用3mL甲醇和3mL水活化平衡SPE柱 | 水滴完后，抽干親和柱 | 用10mL水淋洗親和柱 | |
| 11 | 將4mL溶液A上柱，每秒1-2滴 | 加入2mL甲醇洗脫親和柱，1-3mL/min的速度 | 棄去流出液，抽干親和柱 | |
| 12 | 用3mL誰淋洗SPE柱 | 再次抽干親和柱 | 以5mL甲醇洗脫2次，收集洗脫液 | |
| 13 | 用1mL5%甲醇-水溶液淋洗SPE柱 | 收集全部洗脫液到試管中，氮吹至近干 | 氮吹近干 | |
| 14 | 抽干SPE柱，用4mL甲醇洗脫 | 用1mL初始流動相復(fù)溶 | 以1mL乙腈-水溶液復(fù)溶 | |
| 15 | 收集全部洗脫液后，氮吹近干 | 過濾膜，上機到LC-MS/MS分析 | 過濾膜，上機到LC-MS/MS分析 | |
| 16 | 用1mL初始流動相復(fù)溶 | |||
| 17 | 過濾膜，上機到LC-MS/MS分析 | |||
| 小結(jié) | GB 5009.111-2016 傳統(tǒng)SPE柱法凈化（嘔吐毒素） | GB 5009.22-2016 黃曲霉毒素免疫親和柱 | GB 5009.96-2016 赭曲霉毒素A 免疫親和柱法 | FaTEx 多真菌毒素專用SPE柱法 |
| 目標物 | 嘔吐毒素（1種） | 黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2（4種） | 赭曲霉毒素A（1種） | 黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2，赭曲霉毒素A，嘔吐毒素，玉米赤霉烯酮，伏馬毒素B1、B2，T-2毒素，HT-2毒素（11種） |
| 基質(zhì) 類型 | 谷類及制品、醬及制品 | 谷類及制品、豆類及制品、堅果及籽、油脂及制品、調(diào)味品等 | 玉米、小麥等糧食 | 谷類、米類、玉米、花生、花生醬 |
| 前處理 | 傳統(tǒng)嘔吐毒素SPE柱法凈化法 1、一次凈化測試 1種毒素2、液液萃取操作，多做一次溶劑轉(zhuǎn)換 3、傳統(tǒng)SPE柱需要活化、淋洗和洗脫 | 免疫親和柱法前處理 1、一次凈化測試 4種毒素2、低溫儲運，恢復(fù)常溫后使用 3、需要淋洗、抽干和洗脫 | 免疫親和柱法前處理 1、一次凈化測試 1種毒素2、低溫儲運，恢復(fù)常溫后使用 3、需要淋洗、抽干和洗脫 | FaTEx 真菌毒素專用SPE柱 1、一次凈化測試 11種毒素（包括但不限于）2、常溫使用 3、操作步驟簡化 |
| 效率 | 5-6小時/每批20個樣品 | 4小時/每批20個樣品 | 4小時/每批20個樣品 | 1小時/每批20個樣品 |
| 參考資料： | ||||
| 1、GB 5009.111-2016 食品安全國家標準 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙?；苌锏臏y定 | ||||
| 2、GB 5009.22-2016 食品安全國家標準 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定 | ||||
| 3、GB 5009.96-2016 食品安全國家標準 食品中赭曲霉毒素A的測定 | ||||
| 4、以FaTEx-gen快速凈化萃取套組搭配液相層析串聯(lián)質(zhì)譜分析谷類樣體中之多重霉菌毒素應(yīng)用方案 | ||||
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